現在,市面上能見(jiàn)到的顯色培養基大多用于食品和臨床,但HiMedia廠(chǎng)家生產(chǎn)的顯色培養基覆蓋面廣,能用于供水行業(yè)和環(huán)境監測站。下面為您介紹一下。
顯色培養基的評價(jià)常有多個(gè)指標,如靈敏度,特異性等,它們也與所檢測的樣本類(lèi)型有關(guān)。生產(chǎn)廠(chǎng)家經(jīng)常不提供這些指標。但一些第三方檢測中心或研究機構對此則有相關(guān)研究,并發(fā)表在專(zhuān)業(yè)期刊上。
2011年,《學(xué)術(shù)研究期刊》發(fā)表了一篇對顯色培養基的比較研究。作者來(lái)自埃及國家研究中心水污染研究部,他們通過(guò)用顯色培養基檢測了水中的單核細胞增生李斯特氏菌,對顯色培養基進(jìn)行了評價(jià)(見(jiàn)參考文獻1)。
作者指出,單核細胞增生李斯特菌是廣泛存在的食品致病菌,致死率較高(>20%)。它從家禽、鱒魚(yú)、壁虱、甲殼類(lèi),水、污水、植被、食品中已能被分離出來(lái)。對于人類(lèi)而言,食品和水是常見(jiàn)的致病源。
傳統的培養法分離李斯特菌屬費力耗時(shí),需要增菌乃至預增菌使水中低豐度的單增李斯特菌得到恢復。顯色培養基的出現可改善這一檢測方法。
研究者收集了尼羅河地表水的60個(gè)水樣本。收集水平遵照了200年APHA發(fā)布的指南。所有水樣均收集在無(wú)菌的1L玻璃瓶中(Simax品牌,捷克共和國產(chǎn)),并在4℃條件下運輸到實(shí)驗室。所有樣品在收集后6小時(shí)內進(jìn)行細菌學(xué)檢查。
研究用的單增李斯特氏菌標準菌株編號為NCTC 10890。研究者采用了HiMedia公司生產(chǎn)的HiCrome Listeria Agar Base(以下簡(jiǎn)稱(chēng)HLA)。這款顯色培養基基于李斯特菌*的β葡萄糖苷酶與鼠李糖發(fā)酵。β葡萄糖苷酶裂解顯色底物,使得李斯特菌屬菌落呈現藍色,而其他菌屬為白色。李斯特菌的內部鑒別是基于鼠李糖發(fā)酵。單核細胞增生李斯特菌為藍綠色菌落。研究者還采用了另一個(gè)公司生產(chǎn)的BBL CHROMagar顯色培養基(以下簡(jiǎn)稱(chēng)BBL)。
研究遵循了2005年APHA指南,采用薄膜過(guò)濾法對單核細胞增生李斯特氏菌進(jìn)行了檢測和計數。濾膜放置在培養基上,37℃倒置孵育24小時(shí)。對典型菌落計數,單位為CFU/100 ml。菌落的進(jìn)一步確證采用PCR法。終計算得出靈敏度(真陽(yáng)性率)、特異性(真陰性率)、總有效率(即(真陽(yáng)性+真陰性)×100/總數),并進(jìn)行統計學(xué)分析(t檢驗)。
結果見(jiàn)表1、表2、表3和表4。
表1. 在不同培養基上,單增李斯特氏菌標準菌株的菌落特征
菌株 | 培養基 | 陽(yáng)性菌落 | 正確數 (%) | 假陰性菌落 | 假陰性數(%) |
單核細胞增生李斯特氏菌 | HLA | 藍綠色 | 31 (96.9) | 白色 | 1(3.1) |
BBL | 藍綠色 | 30 (93.8) | 藍色至藍綠色 | 2(6.2) |
表2. 非單增李斯特菌菌株在不同培養基上的菌落情況
菌株 | 培養基 | 真陰性結果 (%) | 假陽(yáng)性結果(%) |
E. coli O157:H7 | HLA | 10 (100) | 0(0.0) |
BBL | 9 (90.0) | 1(10.0) |
表3. 培養基分離標準菌株的有效性
HLA | BBL | PCR | |
真陽(yáng) | 31 | 30 | 31 |
真陰 | 10 | 9 | 9 |
假陽(yáng) | 0 | 1 | 1 |
假陰 | 1 | 2 | 1 |
靈敏度 | 96.8% | 93.7% | 96.8% |
特異度 | 100% | 90% | 90% |
有效率 | 97.6% | 92.8% | 95.2% |
表4. 60個(gè)尼羅河水樣在不同培養基上單增李斯特菌的假陽(yáng)性率
分離株數量 | 假陽(yáng)性數(%) | |
HLA | 40 | 2(5.0) |
BBL | 40 | 5(12.5) |
由上表可見(jiàn),HiMedia的李斯特菌顯色培養基(HiCrome Listeria Agar Base)靈敏度為96.8%,特異度為100%,并已被PCR進(jìn)一步確證,令人滿(mǎn)意,且好于另外一種品牌的顯色培養基。作者認為,HiMedia的李斯特菌顯色培養基不失為一種靈敏、快速、特異的方法,并且無(wú)須任何確證試驗。
HiMedia公司是微生物產(chǎn)品生產(chǎn)商,具有40多年生產(chǎn)研發(fā)經(jīng)驗,具有WHO-GMP認證、ISO9001,ISO13485質(zhì)量體系認證和CE、FDA注冊登記。產(chǎn)品已行銷(xiāo)世界上140多個(gè)國家。
締一生物作為HiMedia公司在中國的代理商,在微生物培養和檢測領(lǐng)域,一如既往地為您帶來(lái)的服務(wù)。